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Xanthomonas fragariae草莓黄单胞菌PCR检测 - 尊龙凯时人生就博品牌推荐

发布时间:2025-07-14   信息来源:詹振珍

产品及特点

Xanthomonas fragariae草莓黄单胞菌PCR检测 - 尊龙凯时人生就博品牌推荐

本产品是基于探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒,具有以下特点:

1. 即开即用

用户只需提供样品DNA模板即可使用。

2. 优化的引物

经过优化的引物等组分,具有高灵敏度。

3. 提供阳性对照

阳性对照的提供使得假阴性样品的区分更加方便。

4. 高特异性

引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区,确保不与其他生物样本的DNA产生交叉反应。

5. 定性与定量检测

本试剂盒既可用于定性检测,也可用于定量检测,定量检测时线性范围至少达到五个数量级。

6. 足够的试剂量

本产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 科研用途

此产品仅限于科研使用。

方法

一、DNA提取(样本制备区)

用户可根据自选方法提取和纯化样品DNA,本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品(样本制备区)

1. 标记6个离心管,分别标记为7、6、5、4、3、2。

2. 使用带芯枪头分别加入45μL DEPC-H2O。

3. 在7号管中加入5μL阳性对照(1×108拷贝/μL),充分震荡1分钟,得1×107拷贝/μL的标准曲线样品,放于冰上待用。

4. 换枪头后,在6号管中加入5μL 1×107拷贝/μL阳性对照,充分震荡1分钟,得1×106拷贝/μL的标准曲线样品,放冰上待用。

5. 换枪头,在5号管中加入5μL 1×106拷贝/μL阳性对照,充分震荡1分钟,得到1×105拷贝/μL的标准曲线样品,放冰上待用。

6. 重复以上操作得到6个稀释度的标准曲线样品,放冰上待用。若不需要制作标准曲线,则将阳性对照稀释至1×105拷贝/μL即可。

三、试剂配制(试剂准备区)

若有N个待检样品,准备N+2个qPCR管(N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照),各PCR管中分别加入相关成分(详见说明书,欢迎向尊龙凯时人生就博咨询)。

四、添加模板(模板添加区)

向各qPCR管中分别加入2μL模板,加入顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照,离心30秒,及时进行扩增反应。

五、扩增反应(扩增及产物分析区)

将PCR管放置于PCR扩增仪器样品槽中进行扩增,扩增程序详见说明书(欢迎咨询尊龙凯时人生就博)。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线,横轴为阳性对照浓度的log值,纵轴为Ct值,绘制标准曲线。根据待测样品的Ct值推算出其DNA浓度的log值。

2. 若不制作标准曲线,则根据以下标准判定结果:阳性对照结果Ct值<30且有明显的指数增长,呈S型曲线;阴性对照结果Ct值为38或无Ct值,无明显指数增长;样本检测结果Ct值<35且有明显的指数增长,表明样本中检测到婴儿利什曼虫,结果为阳性;Ct值在35-38范围需复检。

运输及保存

本产品应低温运输,储存于-20℃,保存期限为一年。阳性对照应单独放置,避免污染其他试剂。