2024年12月18日，复旦大学上海医学院蔡国响教授团队在《Journal of Hematology & Oncology》期刊（影响因子=295）上发表了一篇重要研究论文，标题为“myCAF衍生的外泌体PWAR6通过改变肿瘤微环境中的谷氨酰胺可用性及NK细胞功能，加速CRC肝转移”。该研究揭示了肌成纤维细胞（myCAFs）衍生的外泌体LncRNA PWAR6的作用机制，指出其可调节肿瘤微环境（TME）中谷氨酰胺的可用性，并通过影响谷氨酰胺代谢和NK细胞功能来加速结直肠癌（CRC）肝转移。从而，靶向抑制PWAR6并结合FAPI治疗在临床前模型中显示出有效减少肝转移的潜力，为CRC的临床管理提供了重要可能性。本研究得到了尊龙凯时人生就博的支持，汉恒生物为研究提供了HA-ubiquitin、Myc-NRF2和Flag-Keap1等过表达质粒。

### 研究成果

1. myCAFs增强CRC细胞干性并促进迁移
为了探讨癌症相关成纤维细胞（CAFs）在CRC中的作用，研究团队利用GSE166555和GSE178318单细胞测序数据进行分析，发现CAFs在肝转移结直肠癌（CRLM）患者中显著增多。myCAFs在CRLM中表现出明显升高，而炎性CAFs（iCAFs）与抗原呈递CAFs（apCAFs）的变化不显著。研究建立了myCAF评分，以评估RNA-seq数据中的myCAFs水平，结果表明高评分患者的结直肠癌多处于III期和IV期, Kaplan-Meier分析则显示myCAF评分提高与患者预后差显著相关。

2. myCAF衍生的外泌体PWAR6促进CRC的干性和转移
外泌体作为myCAFs与TME其他组分的主要通讯载体，研究中通过细胞共培养系统探索其对CRC细胞干性和迁移的影响。以外泌体抑制剂GW4869处理后，CRC细胞的迁移速度和干性显著逆转，提示myCAFs通过外泌体促进了CRC细胞的转移。进一步分析发现，myCAF-Exo中的lncRNA PWAR6显著上调，其表达在CAFs、myCAF-Exo和CRC组织中均增加，而在CRC细胞系和健康肠上皮细胞系中无显著差异。

3. exo-PWAR6在CRC患者中的表达及其临床意义
通过应用68Ga-FAPI-PET成像技术，研究团队对不同患者的组织病理样本分析PWAR6水平，发现SUVmax值升高的患者PWAR6表达显著增加。同时，CRLM患者PWAR6表达最高，与生存期存在显著相关性，PWAR6高表达被认为是总生存期的独立不良预测因子。

4. myCAF来源的exo-PWAR6通过上调SLC38A2增强CRC细胞的谷氨酰胺摄取
代谢组学分析显示，myCAFs与正常肝组织间的谷氨酰胺代谢途径明显不同。与myCAFs共培养的CRC细胞在谷氨酰胺摄取和相关代谢物水平上显著增加，同时发现SLC38A2与PWAR6的表达密切相关，表明myCAF衍生的外泌体PWAR6通过调节SLC38A2促进CRC细胞的谷氨酰胺摄取。

5. PWAR6阻断NRF2泛素化和降解
研究揭示PWAR6如何通过与NRF2结合，减少其泛素化，进而调节NRF2的表达。在PWAR6抑制或过表达时，NRF2的相应变化也随之发生，进一步验证了PWAR6对NRF2稳定性的重要影响。

6. NRF2通过转录调节SLC38A2促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取
切实验证了NRF2作为转录因子调控SLC38A2的能力，发现其与CRC进展呈正相关。NRF2敲低处理可显著抑制小鼠肿瘤的生长与转移。

7. PWAR6介导NK细胞谷氨酰胺缺乏促进肿瘤免疫逃逸
研究发现PWAR6的上调导致NK细胞活性显著降低，进而影响NK细胞在肿瘤微环境中的功能，实现了CRC细胞与NK细胞间的“代谢竞争”。此发现有助于理解CRC如何逃避免疫监视。

8. PWAR6是CRC的潜在治疗靶点
基于PWAR6在CRC中的关键作用，研究评估了其作为治疗靶点的潜力。尾静脉注射针对PWAR6的抑制剂ASO-PWAR6显著减轻了肿瘤负担，结合FAPI治疗显示出更显著的疗效，这表明PWAR6可能是CRC治疗中的一个重要靶点。

总结而言，本研究首次揭示了myCAF衍生的外泌体PWAR6在促进CRC细胞干性、迁移及谷氨酰胺代谢方面的重要作用，通过增强SLC38A2的表达及谷氨酰胺摄取，暴露了PWAR6作为结直肠癌免疫逃逸机制的关键角色，同时为开发针对CRC的新治疗策略提供了潜在的靶点，尊龙凯时人生就博将继续关注这一领域的最新研究进展。