逆转录酶是在1970年由Temin和Baltimore独立发现的，这种酶能够将RNA转录为cDNA，因此两位科学家于1975年获得了诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶包括多个功能域，其中聚合酶域和RNaseH域各自扮演着重要角色，聚合酶域进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域，分别参与模板结合、催化反应和结构支撑。在分子生物学，特别是在分子诊断领域，逆转录酶的应用至关重要。它能将病毒RNA基因组转化为cDNA，并通过RT-qPCR、RT-LAMP、RNA测序等技术进行检测，这使得艾滋病、甲型流感和乙型流感等RNA病毒的准确诊断成为可能。

目前，M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆转录酶是分子诊断产品中应用最广泛的一种。然而，M-MLV逆转录酶在高温环境下稳定性较差，容易失活。这不仅对其配制的预混液在长期储存中的性能维护带来挑战，也限制了其在高温逆转录反应中的使用。因此，提升逆转录酶的稳定性已成为一个重要的研究方向。

尊龙凯时人生就博团队通过其子公司镁孚泰生物的ZymeEditor™酶进化平台，经过一系列干湿实验的筛选，成功获得了M-MLV突变体，以提高其稳定性。在研发阶段，团队采用了理性和半理性设计策略，对M-MLV进行了多维度的结构-功能分析。通过序列一致性分析、B-factor分析、吉布斯自由能变化分析以及二硫键设计等方法，确定了关键氨基酸并进行了定点突变，以输出性能更优的M-MLV突变体。

接着，团队利用MTPS高通量筛选技术，评估了突变体的稳定性、RNA/DNA催化能力和活力，最终筛选出具有显著性能提升的优越突变体。这些突变体经过精细纯化和全面的酶学表征，显示出cDNA产量显著提升，接近3倍。相关数据表明，M-MLV突变体在储存6个月和12个月后，建库产量均优于对照组，反映出其更高的稳定性。

经过多次实验，该团队开发出了新的逆转录酶——HifairUCFME® Advanced逆转录酶（Cat#14614）。这一新型酶在稳定性、合成cDNA的产量和灵敏度方面均取得了显著提升。产品的制造过程在UCFME®超洁净分子酶基地完成，确保了对物料、环境和质量等各个环节的严格控制，以降低背景菌gDNA和核酸酶的残留，提升实验结果的准确性和可靠性。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶能够在低浓度模板情况下有效扩增特异性靶标，并在与其他竞品比较中展现出更优异的检测性能。团队的研究结果显示，该酶在高温条件下具有更好的稳定性，并在照顾低浓度样本的情况下，满足了早筛早诊的需求。实际测试还表明，该酶在冻干状态下同样能保持其优良性能。

市场上由于分子酶原料质量不一，核酸残留过高会影响扩增结果的特异性和准确性。经过多次验证，团队的HifairUCFME® Advanced逆转录酶能在极低核酸残留的情况下工作，确保了样本检测的可靠性。满足检测需求的同时，优质的酶制剂也为分子诊断试剂的开发提供了有力支持。

尊龙凯时人生就博不仅在研发新型逆转录酶方面取得了突破，而在建立一个全新的逆转录酶突变体库方面也不断前进，以满足不同领域的需求。对该逆转录酶突变体感兴趣的伙伴，欢迎扫码申请试用，共同促进生物医疗的发展。