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测定左旋咪唑毒性的方法:尊龙凯时人生就博助力生物医疗研究

发布时间:2025-01-15   信息来源:傅雨有

左旋咪唑是一种合成的驱虫药,广泛用于兽医学,主要针对由线虫引起的寄生虫感染。该药物通过作用于线虫的乙酰胆碱离子通道受体(Martin等)来发挥其驱虫作用。此外,左旋咪唑在多个研究领域内也得到广泛应用,尤其是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中,成为研究神经元功能和肌肉生理学不可或缺的工具。为了更深入探讨其毒理学特性,以下举例说明如何使用这种化合物进行研究。

测定左旋咪唑毒性的方法:尊龙凯时人生就博助力生物医疗研究

研究人员可以利用以下实验框架,采用不同的可溶性药物进行毒性研究。实验材料包括带盖的6孔板、NGM培养基、M9缓冲液、左旋咪唑原液(100mM水溶液)、同步成虫种群及WMicrotrackerArena设备。

实验步骤简要介绍如下:

  1. 按照标准程序制备NGM培养皿。
  2. 加入盐和胆固醇后,将左旋咪唑立即加入55°C的NGM琼脂溶液中。
  3. 将左旋咪唑片未接种OP50中,制备后的培养基可在两周内使用,置于4°C保存。
  4. 在实验开始前,确保模板降至室温后进行测定。

具体Protocol步骤包括:

  1. 在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50)。
  2. 用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移至15毫升无菌试管中。
  3. 将蠕虫静置,随后倒入上清液,注意不要扰动沉淀物。
  4. 用5ml M9缓冲液清洗,短暂摇动管子。
  5. 重复上述清洗步骤,最后加入3ml M9缓冲液。
  6. 进行计数,每10μl样本中计数蠕虫数量并计算平均值。
  7. 制备悬浮液,使浓度达到[35虫/10μl]。
  8. 将10μl虫液转移至6孔板中。
  9. 使用WMicroTrackerARENA观察蠕虫的活动。

需注意的是,每个实验至少进行三次技术重复和两次生物重复。实验结果表明,左旋咪唑对N2线虫运动活性的抑制作用呈现剂量依赖性。在6孔板中,每孔选择35个年轻的N2成虫,并在23℃下记录4小时的运动活动。数据代表四个独立实验的平均值,并进行重复实验分析。

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